课题

心肌梗死（MI）小鼠模型构建与验证
成功构建心肌梗死小鼠模型，并通过三氯化四氮唑（TTC）染色评估梗死区域，结合心电图（ECG）进行生理功能检测，利用苏木精-伊红（H&E）染色评估心肌组织的病理变化，验证模型的成功构建与稳定性。

MI模型小鼠心肌巨噬细胞DNA损伤分析
在不同时间点收集MI模型小鼠的心肌巨噬细胞，使用免疫荧光染色及流式细胞术检测巨噬细胞的DNA损伤情况，探究心肌梗死过程中DNA损伤的动态变化及潜在诱因。

DNA损伤后巨噬细胞表型及功能变化研究
通过实时定量PCR（qPCR）、流式细胞术和蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术系统评估DNA损伤对心肌巨噬细胞表型的影响，深入分析其在炎症因子表达、吞噬能力及细胞分化等方面的功能变化。

巨噬细胞DNA损伤模型的体外构建与功能表征
体外分离小鼠腹腔巨噬细胞，利用H₂O₂、阿霉素（Doxorubicin，DOX）和博莱霉素（Bleomycin，BLM）构建细胞DNA损伤模型，并通过蛋白质免疫印迹、免疫荧光和流式细胞术对损伤模型的成功性及巨噬细胞表型、功能标志物的变化进行系统性表征。

心肌细胞与DNA损伤巨噬细胞的共培养实验
分离心肌细胞并在体外诱导其凋亡，将凋亡的心肌细胞与DNA损伤的巨噬细胞进行共培养，通过检测巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬效率（即胞葬功能）评估DNA损伤对巨噬细胞吞噬功能的影响。

蛋白质相互作用的免疫沉淀验证
利用免疫沉淀-蛋白质印迹（IP-WB）技术验证转录因子SP1与DNA甲基转移酶1（DNMT1）之间的相互作用，进一步探索其在DNA损伤应答机制中的调控网络。

双荧光素酶报告基因检测
通过双荧光素酶报告基因实验评估SP1对巨噬细胞表面受体Cx3cr1和Mertk转录活性的调控效果，以明确其在调节巨噬细胞功能中的作用。

染色质免疫沉淀分析
运用染色质免疫沉淀（ChIP）技术验证DNMT1与Cx3cr1和Mertk基因启动子区的结合情况，进一步阐明DNA甲基化在巨噬细胞表型调控中的机制。